游离/总英夫利昔单抗（类克）抗体半定量检测试剂盒（酶联免疫法）
SHIKARI® (Q-ATIDUO) Semi-Quantitative Free/Total Antibodies to Infliximab ELISA
| 货号 |
INF-QNFT-REMI |
| 规格 |
96人份/盒 |
| 检测时间 |
80min/95min |
| 样本类型 |
血清
、血浆 |
| 样本量 |
10μl |
| 回收率 |
- |
| 检测限 |
156ng/mL |
| 方法学 |
酶联免疫法 |
| 生产商 |
土耳其MATRIKS BIOTEK |
预期用途
用于半定量分析血清和血浆样本中的游离和总英夫利昔单抗抗体
。本试剂盒用类克®进行优化
。仅供科研使用
。
背景知识
英夫利昔单抗是一种肿瘤坏死因子(TNFα)拮抗剂
，是一种嵌合单克隆IgG1抗体
，由人类恒定区（75%）和鼠可变区（25%）组成
。英夫利昔单抗是通过持续灌注培养的重组细胞系产生的
。TNFα是一种关键促炎细胞因子
，与慢性炎症疾病有关
。在炎症疾病中可以观察到它的过度活跃和增强的信号通路
，在炎症疾病中它进一步激活促炎级联反应
。通过与可溶性亚基和TNFα的膜结合前体结合
，英夫利昔单抗破坏TNFα与其受体的相互作用
，也可能导致产生TNFα的细胞溶解
。
英夫利昔单抗是一种IgG1κ单克隆抗体
，以高亲和力与可溶性和跨膜形式的TNFα结合
，破坏促炎级联信号
。抗体与TNFα的结合阻止了TNFα与其受体相互作用
。英夫利昔单抗不能中和TNFα（淋巴毒素-α）
，这是一种使用与TNFα相同受体的相关细胞因子
。TNFα的阻断作用进一步导致局部和全身促炎细胞因子（即IL-1
、IL-6）的下调
、淋巴细胞和白细胞向炎症部位迁移的减少
、诱导TNF产生细胞（即激活的单核细胞和T淋巴细胞）的凋亡
、核因子-κB抑制剂水平的升高
，以及内皮粘附分子和急性期蛋白的减少
。其对TNFα的抑制作用在人成纤维细胞
、内皮细胞
、中性粒细胞
、B和T淋巴细胞以及上皮细胞中得到证实
。英夫利昔单抗还可以抑制滑膜细胞和/或软骨细胞合成的组织降解酶的产生
。
治疗药物监测(TDM)是在指定的时间间隔测量特定药物的临床实践
，以保持患者血液中的恒定浓度
，从而优化个体给药方案
。药物监测的适应症包括疗效
、依从性
、药物-药物相互作用
、毒性避免和治疗停止监测
。此外
，TDM有助于发现不依从患者的用药依从性问题
。
21世纪
，生物医药产品（生物制剂）改变了世界范围内血液或实体恶性肿瘤患者的治疗格局
。如今
，随着第一波生物制剂的专利独占期即将到期或已经到期
，一些生物仿制药产品（即被认为在质量
、安全性和有效性方面与批准的“仿制”生物制剂类似的生物制剂）正在开发或已被批准供人类使用
。
与所有生物制剂一样
，生物仿制药是一种结构复杂的蛋白质
，通常使用转基因动物
、细菌或植物细胞培养系统制造。由于这种分子复杂性和制造过程的独有性质
，不可避免地会导致使用不同的宿主细胞系和表达系统以及制造条件的相关差异
，因此不可能制造出与“仿制”生物制剂一样的精确制剂
。
当给患者服用时
，所有治疗性蛋白质都有可能诱发不必要的免疫反应（即刺激抗药物抗体[ADAs]的形成）
。免疫反应的影响范围从无明显影响到药代动力学变化
、疗效丧失和严重不良事件
。此外
，生物制剂的免疫原性特征可能会因其生产过程中的微小差异而显著改变
，这些差异伴随着产品属性的变化
，以及给药计划
、给药途径或患者群体的差异
。
SHIKARI®酶联免疫法检测试剂盒可用于测量药物浓度和抗药物抗体
。SHIKARI®英夫利昔单抗酶联免疫法产品线
：
| 品牌 |
描述 |
货号 |
| SHIKARI® (Q-INFLIXI) |
英夫利昔单抗（类克®） |
游离药物 |
INF-FD-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔单抗（类克®） |
抗体筛查 – 定性 |
INF-QLS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATI) |
英夫利昔单抗（类克®） |
抗体筛查 – 定量 |
INF-QNS-REMI |
| SHIKARI® (Q-ATIDUO) |
英夫利昔单抗（类克®） |
抗体筛查 – 游离/总半定量 |
INF-QNFT-REMI |
| SHIKARI® (Q-REMS) |
英夫利昔单抗（生物类似药） |
游离药物 |
INF-FD-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔单抗（生物类似药） |
抗体筛查 – 定性 |
INF-QLS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔单抗（生物类似药） |
抗体筛查 – 定量 |
INF-QNS-REMS |
| SHIKARI® (S-AIR) |
英夫利昔单抗（生物类似药） |
抗体筛查 – 游离/总半定量 |
INF-QNFT-REMS |
主要组成成分
| 组分标签 |
规格 |
组分说明 |
| Microtiter Plate |
12 x 8孔 |
微孔板
拆开的微孔板条
。微孔板12排
，每排8孔
，包被英夫利昔单抗
。 |
| Controls |
1.0 mL(阴性)
0.5 mL(阳性) |
阴性质控品和阳性质控品
即用型
。含有人血清和稳定剂
，< 0.1% NaN3
。 |
| Assay Buffer |
1 x 50 mL |
检测缓冲液
即用型
。蓝色
，含有蛋白质
，< 0.1% NaN3
。 |
Immune
Complex
Control |
1 x 1.5 mL |
免疫复合质控品
即用型
。含有抗英夫利昔单抗或英夫利昔单抗免疫复合物
、人血清和稳定剂
，< 0.1% NaN3
。 |
Dissociation
Buffer |
1 x 25 mL |
解离液
即用型
。含有稀释的酸
。 |
Neutralisation
Buffer |
1 x 5 mL |
中和缓冲液
即用型
。 |
| Conjugate |
1 x 12 mL |
辣根过氧化物酶结合物
即用型
。红色
。含有HRP结合物
、稳定剂和防腐剂
。 |
| Substrate |
1 x 12 mL |
TMB底物溶液
即用型
。含有3, 3′, 5, 5′ -四甲基联苯胺(TMB)
。 |
| Stop Buffer |
1 x 12 mL |
TMB终止液
即用型
，1N HCI。 |
| Wash Buffer |
1 x 50 mL |
浓缩洗液(20x)
浓缩洗液(20x)应在实验前按照【试剂准备】中给出的稀释比例进行稀释
。
含有吐温20的缓冲液
。 |
| Foil |
2 块 |
封板膜
孵育时封盖微孔板 |
储存条件及有效期
试剂盒在10-30°C下运输
，应在2-8°C下长期储存
。远离热源或避免阳光直射
。已开封的微孔板条
，在2-8°C下保存在密封袋中
，可稳定至试剂盒标示的有效期
。
工作洗液配制后须储存于密封容器中
，在2-8℃下可保存2周
。
生产日期及失效日期见试剂盒标签
。
适用仪器
适用于具有450nm
、650nm波长的酶标仪
。
样本要求
血清
、血浆（EDTA
、肝素）
应遵守静脉穿刺的常规预防措施
。不要使用严重溶血
、黄疸或血脂样本
。实验前
，应先对混浊的样本进行离心
，以去除任何颗粒物质
。避免血清或血浆样本反复冻融
。
实验前
，应按照【试剂准备】中给出的稀释比例对样本进行稀释
。
药物输注可能会伪装或掩盖血清或血浆样本中药物抗体的存在
。因此
，采血时间对于抗体检测至关重要
。建议在预定剂量（峰谷样本）之前采集血样
。
样本保存
血清或血浆样本在2-8℃可保存2天
，在-20℃下可保存6个月
。
性能指标
特异性
：与天然血清免疫球蛋白无交叉反应
。
精确度
：批内和批间CVs < 30%。
临界值
：必须由用户/实验室根据科学标准计算/设定或验证临界值
。
质控报告包含特定批号的性能指标数据
，并随每个试剂盒单独提供
。如果需要更多的性能指标数据
，请咨询代理商
。
参考文献
1. Present DH, Rutgeerts P, Targan S, Hanauer SB, Mayer L, van Hogezand RA, Podolsky DK, Sands BE, Braakman T, DeWoody KL, Schaible TF, van Deventer SJ. Infliximab for the treatment of fistulas in patients with Crohn's disease. N Engl J Med 1999 May 6;340(18):1398-405.
2. Klotz U, Teml A, Schwab M. Clinical pharmacokinetics and use of infliximab. Clin Pharmacokinet 2007;46(8):645-60.
3. Remicade® (infliximab) product monograph
4. Remsima® (infliximab) product monograph
