英文名称 ：Calprotectin ELISA KIT（stool）

【预期用途】

本产品仅供科研使用 。粪便钙卫蛋白酶联免疫吸附分析试剂盒用于定量测定人粪便中钙卫蛋白（MRP 8/14）的含量 。

【概要说明】

钙卫蛋白又叫MRP8/14 ，L1 ，(p8,14) ，p34 。

构成钙卫蛋白异聚体的两种蛋白名称 ：

S100A8 ，钙粒蛋白A ，MRP8（移动抑制因子相关蛋白8型） ，CP-10（小鼠） ；

S100A9 ，钙粒蛋白B ，MRP14（移动抑制因子相关蛋白14型） 。

钙卫蛋白是一种钙结合蛋白，主要由嗜中性粒细胞和单核细胞分泌 。粪便中的钙卫蛋白是肿瘤性和炎症性肠胃疾病的标志物 。

由于很难区分肠易激综合征和慢性肠炎疾病 ，因此要经常对病人进行结肠窥镜检查。而钙卫蛋白检测能够很好区分这两种疾病 。粪便中钙卫蛋白水平与克罗恩病和溃疡性结肠炎的组织学 、内窥镜检查具有显著一致性 ，也和肠炎疾病的检测金标准——粪便中铟-111标记的嗜中性粒细胞分泌物具有极高相关性 。由于检测铟-111标记的嗜中性粒细胞的成本较高（住院治疗 、同位素分析和处理）且病人暴露于放射性环境下 ，不建议对儿童和孕妇采用该方法 。

钙卫蛋白水平提高预示着相应疾病的复发 ，是一个比CRP,ESR,HB更好的标志物 。将上述标志物与结肠直肠癌的标准便潜血检测比较后发现 ，粪便中钙卫蛋白检测在诊断上更具优势 ：如果粪便中钙卫蛋白水平很低 ，极大程度上说明未患有器官性肠道疾病 。

检测粪便中钙卫蛋白水平有助于 ：

l  急性炎症的标志物

l  评估肠胃炎症程度

l  监测克罗恩病 、溃疡性结肠炎或息肉摘除后病人状况

进行粪便检查时区分肠炎疾病（克罗恩病 、溃疡性结肠炎）和肠易激综合症 。

【样本要求】

1．采用粪便样本 。

尽管粪便中的钙卫蛋白保持稳定约6天 ，仍然建议将粪便样本于2-8°C下保存且不超过48小时 。-20°C下可长期保存 。允许将样本缓慢解冻（于2-8°C下过夜） ，分析前平衡至室温 。

2．样本提取

1）建议使用粪便样本提取试剂盒 ，取100 mg粪便样本溶于5ml提取缓冲液中 。

缓冲液体积恒量 ：5ml

稀释因子 ：1 ：50

2）或选择人工方法 ，称重80-120mg粪便样本 ，记下确切重量 。

a. 向样本加入5ml缓冲液 。

缓冲液体积恒量 ：5ml

稀释因子取决于样本量 ，使用多少样本量应考虑后面的计算 。请参考下表中正确的稀释因子 ：

b. 每个样本所需缓冲液体积取决于样本量（见下表） 。稀释因子保持1 ：50不变 。

因此 ，对于所有样本来说 ，相同的稀释因子可应用于后面的结果评估 。

混合粪便样本和缓冲液 ，于涡旋混合器上振荡至少30秒（取决于粪便硬度） 。

移取1ml粪便悬浮液到EP管内 ，13000g条件下离心5分钟 。

3．样本稀释

取样本提取上清液 ，用冲洗缓冲液以1 ：50比例稀释 。例如 ：20ml上清液（稀释1）+980ml冲洗液=1 ：50（稀释2） 。移取100ml稀释2的上清液用于检测分析 。

(Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681)

【参考文献】

1.     Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681

2.     Fagerhol et al. (2000) The Lancet 356:1783-1784

3.     Tibble et al. (2000) Gut 47:506-513

4.     Tibble et al. (2000) Gastro 119:15-22